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信帆生物:miRNA實(shí)驗(yàn)代做,miRNA的純化技術(shù)分析

更新時(shí)間:2016-01-14      瀏覽次數(shù):876

上海信帆生物代做miRNA實(shí)驗(yàn),PCR技術(shù)服務(wù),代測(cè)時(shí)間短,價(jià)格優(yōu),專業(yè)的實(shí)驗(yàn)操作人員,的,保證您的每一份實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均真實(shí)可靠,咨詢!

microRNA(miRNA)是天然存在、長(zhǎng)約22個(gè)核苷酸的非編碼RNA,它們介導(dǎo)了轉(zhuǎn)錄后的基因調(diào)控。miRNA在許多生物過(guò)程中扮演了重要角色,包括分化和發(fā)育、細(xì)胞信號(hào)通路以及對(duì)感染的反應(yīng)。大量的證據(jù)表明,miRNA表達(dá)的失調(diào)是一些疾病過(guò)程(包括許多癌癥)的起因或指示劑。研究還發(fā)現(xiàn)血清和血漿中可以檢測(cè)到循環(huán)miRNA,且它們的表達(dá)因疾病而異,這一發(fā)現(xiàn)說(shuō)明循環(huán)miRNA的表達(dá)特征可作為疾病診斷和預(yù)防的生物標(biāo)志物,具有巨大潛力。

miRNA研究的成功依賴于高性能工具和技術(shù)的使用。QIAGEN是一個(gè)一站式供應(yīng)商,滿足您在miRNA純化、定量和功能鑒定上的所有需求。歡迎訪問(wèn)QIAGEN的GeneGlobe® 網(wǎng)頁(yè)),訂購(gòu)miRNA特異的產(chǎn)品,并發(fā)現(xiàn)大量寶貴的基因信息、通路信息和生物信息學(xué)工具。

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QIAGEN提供了以下方案:

一、miRNA純化
利用miRNeasy Kits和PAXgene® Kits純化高質(zhì)量總RNA,包括miRNA。

二、miRNA表達(dá)譜分析
利用miScript® miRNA PCR Arrays快速分析整個(gè)miRNA組(miRNome)或通路聚焦的miRNA分析板

三、miRNA生物發(fā)生和調(diào)控研究
利用miScript PCR System同時(shí)定量成熟的miRNA(聯(lián)合miScript Primer Assays)、前體miRNA(聯(lián)合miScript Precursor Assays)和mRNA目標(biāo)(聯(lián)合QuantiTect® Primer Assays)。

四、miRNA功能分析
利用miScript miRNA Mimics、Inhibitors和Target Protectors確定miRNA的功能。

miRNA的純化

高質(zhì)量miRNA純化

高質(zhì)量的總RNA(包括miRNA)的純化,是成功的miRNA定量實(shí)驗(yàn)的前提條件,因?yàn)橘|(zhì)量不佳的RNA會(huì)阻礙酶促反應(yīng),且小RNA的低效純化會(huì)導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。為miRNA純化而推出的miRNeasy 和PAXgene miRNA Kits 確保您的實(shí)驗(yàn)有zui高質(zhì)量的RNA。miRNA產(chǎn)量?jī)?yōu)于其他miRNA純化方法,如苯酚抽提和沉淀。如有必要,miRNA純化也可在QIAcube®或QIAsymphony® 儀器上自動(dòng)開(kāi)展

總RNA的純化或miRNA的富集

miRNeasy 和PAXgene miRNA Kits 可純化總RNA,包括~18 nt以上的RNA。另外,對(duì)于所有樣品類型,除包含嚴(yán)重降解RNA的樣品(如FFPE組織)和包含少量大RNA(如血清/血漿樣品)的樣品外,miRNeasy Kits可分別純化富含miRNA的組分(< ~200 nt)和總RNA組分(> ~200 nt)。利用miRNeasy 和PAXgene miRNA Kits 純化得到的RNA適合各種下游應(yīng)用,如northern blot分析、芯片分析及實(shí)時(shí)定量RT-PCR。在某些應(yīng)用(如一些芯片系統(tǒng))中,小RNA的富集可降低背景,但利用miScript miRNA PCR Arrays 和miScript Primer Assays 的分析則不需要。

從組織和細(xì)胞中純化

miRNeasy Mini、Micro和96 Kits 可從組織和細(xì)胞中純化RNA,即使所用的起始材料量很少。RNA可從各種組織和細(xì)胞中純化,包括難以裂解的組織。包括miRNA在內(nèi)的總RNA純化實(shí)現(xiàn)了miRNA與那些目標(biāo)mRNA、參照看家基因或其它目的mRNA表達(dá)水平的直接比較。

從血清或血漿中純化循環(huán)miRNA

循環(huán)miRNA可作為檢測(cè)不同癌癥及其他疾?。ㄈ缣悄虿。┑臐撛谏飿?biāo)志物。利用從血清或血漿中純化得到的RNA,研究已發(fā)現(xiàn)一些miRNA在一些癌癥中的*表達(dá)。miRNeasy Serum/ Plasma Kit 能夠從少量的血漿或血清中純化總RNA。miRNeasy Serum/Plasma Spike-In Control提供了一個(gè)合成的加標(biāo)對(duì)照,適用于研究血清或血漿樣品時(shí)的標(biāo)準(zhǔn)化。純化得到的RNA之后可用于miScript PCR System,以發(fā)現(xiàn)生物標(biāo)志物。

從FFPE切片中獲得高純度RNA

交聯(lián)和片段化讓FFPE切片的核酸純化挑戰(zhàn)性。miRNeasy FFPE Kit 提供了特殊的裂解和孵育條件,對(duì)RNA解交聯(lián),并有效純化RNA,同時(shí)避免RNA的進(jìn)一步降解。為了去除痕量的小DNA片段,以免妨礙下游分析(如實(shí)時(shí)定量RT-PCR),RNA經(jīng)過(guò)DNase 和DNase Booster Buffer 處理,此緩沖液優(yōu)化了DNase反應(yīng)。利用miRNeasy FFPE Kit 制備的總RNA隨后可用于miScript PCR System,以釋放寶貴的表達(dá)數(shù)據(jù)。

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